Belajar Mengenai Penggunaan siRNA dalam Penyelidikan Genetik Molekul

siRNA, yang bermaksud asid Ribonukleik yang mengganggu kecil, adalah kelas molekul RNA terkandas. Ia kadang-kadang dikenali sebagai RNA mengganggu pendek atau RNA membungkam.

Sebelum menyelam ke dalam apa sebenarnya siRNA, penting untuk mengetahui fungsi RNA. Asid ribonucleic (RNA) adalah asid nukleik yang terdapat dalam semua sel hidup dan berfungsi sebagai utusan yang membawa arahan dari DNA untuk mengawal sintesis protein (nota: dalam sesetengah virus RNA dan DNA juga membawa maklumat genetik).

- RNA interfering kecil (siRNA) adalah kepingan kecil RNA double-stranded (ds), biasanya sekitar 21 nukleotida panjang, dengan 3 'overhangs (2 nukleotida) di setiap hujung yang boleh digunakan untuk " mengganggu "dengan terjemahan protein dengan mengikat dan mempromosikan degradasi RNA utusan (mRNA) pada urutan tertentu.

Dengan demikian, siRNA menghalang pengeluaran protein tertentu berdasarkan urutan nukleotida mRNA yang sepadan dengannya. Proses ini dipanggil gangguan RNA (RNAi), dan juga boleh dirujuk sebagai pembubaran siRNA atau siRNA knockdown.

Di mana Mereka Datang Dari

siRNA secara amnya dianggap berasal dari ranting yang semakin tua atau berasal dari luar organisma) RNA yang diambil oleh sel dan menjalani proses selanjutnya.

RNA sering datang dari vektor, seperti virus atau transposon, dan telah dijumpai memainkan peranan dalam pertahanan antiviral, kemerosotan mRNA atau mRNA yang dihasilkan yang mana terjemahannya telah digugurkan, dan mencegah gangguan DNA genomik oleh transposon.

Setiap strand siRNA mempunyai kumpulan fosfat 5 'dan 3' hidroksil (OH). Mereka dihasilkan daripada dsRNA atau RNA gelung rambut yang selepas memasuki sel dipisahkan oleh enzim seperti RNase III, dipanggil

Dicer , menggunakan RNase atau enzim sekatan. SiRNA kemudiannya dimasukkan ke dalam kompleks protein multi-subunit yang dikenali sebagai RNAi-induced silencing complex (RISC). RISC "mencari" mRNA sasaran yang sesuai, di mana siRNA kemudian melepaskan dan, dipercayai, strain antisense mengarahkan penguraian dari helai mRNA pelengkap, dengan menggunakan gabungan enzim endo- dan exonuclease.

Penggunaan Perubatan dan Terapi Penggunaan

Apabila sel mamalia berhadapan dengan RNA double stranded seperti siRNA, ia mungkin kesilapan sebagai produk sampingan virus dan memulakan tindak balas imun. Di samping itu, pengenalan siRNA boleh menyebabkan penargetan yang tidak diingini di mana protein lain yang tidak mengancam juga boleh diserang dan tersingkir.

Memperkenalkan terlalu banyak siRNA kepada badan boleh mengakibatkan peristiwa tidak spesifik disebabkan oleh pengaktifan tindak balas imun yang semula jadi, tetapi memandangkan keupayaan untuk mengalahkan mana-mana gen yang menarik, siRNAs mempunyai potensi untuk banyak kegunaan terapeutik.

Dengan mengubahsuai kimia siRNA untuk meningkatkan sifat terapi mereka seperti:

peningkatan aktiviti

• peningkatan kestabilan serum dan kurang sasaran yang kurang
• menurunkan pengaktifan imunologi
• Banyak penyakit boleh berpotensi dirawat dengan menghalang ekspresi gen . Oleh itu, reka bentuk siRNA sintetik untuk kegunaan terapeutik telah menjadi objektif popular bagi banyak syarikat biopharmaceutical.

Pangkalan data terperinci bagi semua pengubahsuaian kimia sedemikian dikendalikan secara manual di siRNAmod, pangkalan data yang dikendalikan secara manual dari siRNA yang diubahsuai secara kimia yang disahkan secara eksperimen.

Sumber:

_{Tsai, C. S. Biomacromolecules: Pengenalan kepada struktur, fungsi dan informatika. Wiley-Liss, 2007.}

_{Whitehead, K. A.; Dahlman, J. E.; Langer, R. S.; Anderson, D. G. (2011). "Penghisapan atau Rangsangan? Penghantaran SiRNA dan Sistem Imunisasi".}

_{Kajian Semula Kejuruteraan Kimia dan Biomolekul 2 : 77-96. Alekseev OM, Richardson RT, Alekseev O, O'Rand MG (2009). "Analisis profil ekspresi gen dalam sel HeLa sebagai tindak balas kepada overexpression atau pengurangan mediasi siRNA dari NASP". Biologi Reproduktif dan Endokrinologi: 45.}